Иммунологические нарушения при системной красной волчанке развиваются во всем организме и про­являются воспалением, поражением сосудов (васкулопатией и васкулитом) и отложением иммунных комплексов. Иммунология занимает ведущее место в возникновении этого заболевания.

Наиболее подробно изучены патологические изменения в почках: пролиферация мезангиальных клеток и мезангиального матрикса, воспаление, пролиферация клеток, поражение базальной мембраны, отложение иммунных комплексов. При электронной микроскопии отложения выявляют в мезангии, а также на субэндотелиальной и субэпителиальной сторонах базальной мембраны клубочков. Поражение почек классифицируют в соответствии с двумя системами, учитываемыми при оценке клинической стадии. Волчаночный нефрит имеет множество вариантов, отличаю­щихся по тяжести и частоте.

Поражения кожи при системной красной волчанке представляют воспаление и дегенерацию на грани­це дермы и эпидермиса: базальный и зародышевый слои вовлекаются в первую очередь. Зернистые отложения компонентов комплемента имеют вид полоски, которую можно наблюдать при иммунофлюоресцентной микроскопии. Некротизирующий васкулит также приводит к поражению кожи. В других систе­мах органов, страдающих при волчанке, обычно развивается неспецифическое воспаление или поражение сосудов, однако в некоторых случаях патологические изменения бывают минимальными. К примеру, несмотря на тяжесть поражения ЦНС, типичные изменения включают кортикальные микроинфаркты и умерен­ную васкулопатию с дегенеративными или пролиферативными изменениями. Воспаление и некроз вследствие васкулита возникают редко.

В сердце можно обнаружить неспецифические очаги воспаления в перикарде, миокарде и эндокарде даже при отсутствии клинически значимых проявлений. Бородавчатый эндокардит (известный как эндокардит Либмана-Сакса) - клас­сическое поражение сердца при системной красной волчанке, проявляющееся образованием вегетаций, чаще на митральном клапане. Вегетации состоят из иммунных комплексов, вос­палительных клеток, фибрина и некротизированных фрагментов.

Часто при системной красной волчанке наблюдают окклюзионную васкулопатию с венозным и артери­альным тромбозом. Тромбообразование может быть резуль­татом воспаления, но аутоантитела также могут запускать тромбоз. Эти антитела носят название антифосфолипидных, антикардиолипиновых антител или волчаночных антикоагулянтов. Некоторые из указанных антител связываются с липидными антигенами, остальные направлены против сывороточного белка р2-гликопротеина I, образующего комплексы с липидами. Поражение сосудов при СКВ происходит в результате увеличения адгезивности эндотелиальных клеток посредством механизма, аналогичного реакции Швартцмана, запускаемой грам- отрицательными бактериями.

Связь с воспалением других патологических изменений, обнаруживаемых при СКВ, точно не доказана. Больные, в том числе женщины без известных факто­ров риска сердечно-сосудистых заболеваний, часто страдают быстропрогресси­рующим атеросклерозом и имеют высокий риск инсульта и инфаркта миокарда. Являются эти нарушения результатом глюкокортикоидной терапии, артериаль­ной гипертензии или поражения сосудов на фоне тяжелого хронического воспа­ления - неизвестно. Остеонекроз, как и нейродегенерация у людей с тяжелыми хроническими заболеваниями, может быть результатом васкулопатии, иммуно­логических поражений или побочным эффектом лекарственных средств.

Антинуклеарные антитела

Основное иммунологическое нарушение при системной красной волчанке - образование аутоантител, направленных против компонентов ядер, цитоплазмы или поверхности собствен­ных клеток организма. Кроме того, сыворотка крови при волчанке содержит антитела к таким растворимым молекулам, как и факторы свертывания. В связи с большим количеством антигенов-мишеней СКВ относят к системным аутоиммунным заболеваниям.

Из всех аутоантител в сыворотке крови чаще всего (в 95% случаев) обнаружи­вают антитела к компонентам ядра (антинуклеарные антитела, АНА), наиболее характерные для системной красной волчанки. Эти антитела связываются с ДНК, рибонуклеиновой кислотой (РНК), ядерными белками и комплексами «белок-нуклеиновая кис­лота». Все молекулы, против которых направлены АНА, являются высококонсервативными, присутствуют в клетках в составе различных комплексов (например, нуклеосомы). Более того, эти молеку­лы в зависимости от ситуации обла­дают внутренней иммунологической активностью. Эта активность проявляется в стимуляции врожденного иммунитета через рецепторы, известные как Toll-like рецепторы (TLR). Они способны распознавать разнообразные чужеродные и собственные молекулы, включая молекулы ДНК, одно- и двуспиральной РНК, представляющие собой TLR-лиганды.

Антитела к определенным ядерным антигенам (например, к ДНК и гистонам) часто образуются одновременно. Это явление получило название сцепления. Сцепление предполагает, что комплекс, а не отдельные компоненты, является мишенью аутореактивности, как и стимулирующий ее антиген. Среди всех АНА при СКВ два вида являются специфичными. Антитела к двуспиральной ДНК обнаруживают только у больных волчанкой, в связи с чем они включены в критерии классификации. Антитела к ДНК являются серологическими маркёрами, но они отличаются экспрессией и ассоциированными клиническими проявлениями. Количество антител к ДНК может значительно варьировать.

Возможно, наиболее отличительная черта синтеза анти-ДНК - его связь с иммунопатологическими нарушениями при системной красной волчанке, особенно с гломерулонефритом. Это заключение было сделано на основании выявленной корреляции между уровнем антител к ДНК в крови и активностью заболевания, а также развития нефрита при введении антител к ДНК нормальным животным. Связь между количеством антител к ДНК и активностью нефрита неустойчива. Некоторые больные с активным нефритом могут иметь низкий уровень антител к ДНК, тогда как у других при высоком их уровне нефрит не развивается.

Развитие нефрита в отсутствие антител к ДНК можно объяснить патогенети­ческим действием других аутоантител. В противопо­ложной ситуации при клинической ремиссии на фоне серологической активности следует предполагать, что только некоторые антитела к ДНК провоцируют гломерулонефрит. Антитела, обладающие этим свойством, называют нефритогенными. К признакам, ответственным за патогенность, относят изотип, заряд, способность фиксировать комплемент и связываться с компонентами клубочков. Антитела к ДНК - подтип патогенных антител, связывающихся с нуклеосомами (форма ДНК в циркулирующей крови и иммунных отложениях). В отсутствии нефрито­генных антител можно быть уверенным только после проведения полного анали­за на все антинуклеосомные антитела.

В дополнение к прямому участию в возникновении нефрита антитела к ДНК вызывают иммунные нарушения, в результате чего усиливается системное вос­паление (следовательно, усугубляется нефрит). Так, иммунные комплексы с ДНК, могут стимулировать экспрессию интерферона альфа специализированной популяцией дендритных клеток, известных как плазмоцитоидные дендритные клетки. Такой ответ требует присутствия в иммунных компонентах как антител, так и ДНК и реализуется при участии Fc-рецепторов. Механизм данного ответа пока не совсем изучен. Считают, что в стимуляции могут участвовать TLR, а также другие сигнальные системы, не связанные с TLR, реагирующие на интернализованные нуклеиновые кислоты. Антитела к другим ядерным антиге­нам, в том числе к РНП-комплексам, также могут стимулировать данный ответ, это увеличивает вероятность того, что иммунные комплексы, помимо поврежде­ния органов, участвуют в нарушении функции иммунной системы.

Помимо антител к ДНК, другие аутоантитела также могут вызывать харак­терные клинические проявления вследствие специфического поражения опре­деленных органов при системной красной волчанке. Связь других аутоантител с проявлениями заболевания представлена ассоциациями антител к рибосомальным Р-белкам (анти-Р) с нервно-психическими нарушениями и гепатитом; антител к фосфолипидам с сосуди­стым тромбозом, тромбоцитопенией и повторными выкидышами; антител к клеткам крови и цитопениями.

Влияние АНА на клинические проявления системной красной волчанки является сложным для пони­мания, поскольку внутриклеточное расположение антигенов-мишеней по идее должно защищать их от действия антител. Локализация этих антигенов не всегда бывает фиксированной: некоторые из них могут перемещаться на мембрану и становиться доступными для атаки антителами либо во время роста клетки, либо во время апоптоза. Таким образом, во время развития сердечной мышцы молекула, которая распознается антителами к Ко, появляется на поверхности миоцитов, и в присутствии комплемента развивается локальное воспаление с повреждением проводящей системы.

В связи с влиянием поражения почек на тяжесть состояния больных и смерт­ность нефриту как проявлению системной красной волчанки всегда уделяли много внимания. В клини­ческих наблюдениях обнаружено, что поражение почек при СКВ развивается в результате отложения иммунных комплексов, поскольку активный нефрит сопровождается повышением содержания антител к ДНК, снижением общей гемолитической активности системы комплемента. Антитела к ДНК фиксируются преимущественно в почках, поэтому можно предположить, что «ДНК/анти-ДНК» иммунные комплексы являются существенными патогенными факторами. ДНК в этих комплексах, вероятно, находится в форме нуклеосом, поэтому другие антитела к их компонентам также могут участвовать в образовании иммунных комплексов.

Иммунные комплексы могут вызывать повреждение почек, но их количество в сыворотке обычно ограничено. Эти данные позволили предпо­ложить, что комплексы вероятнее всего образуются не в циркуляции. Согласно такой точке зрения, иммунные комплексы собираются в почках на ДНК или других компонентах нуклеосом, прилежащих к базальной мембра­не клубочков. Другой механизм волчаночного нефрита - непосредственное взаимодействие аутоантител с клубочковыми антигенами. Многие антитела к ДНК полиспецифичны и взаимодействуют с другими молекулами (кроме ДНК). Связывание антител к ДНК с этими молекулами активирует систему комплемента и инициирует воспаление.

Патогенез других иммунологических нарушений при системной красной волчанке менее изучен, однако вероятным меха­низмом считают отложение иммунных комплексов в соответствующих органах. Действительно, частое сочетание сниженного содержания комплемента и при­знаков васкулита с активной волчанкой позволяет предполагать, что иммунокомплексы играют серьезную роль в запуске повреждения органов (или обострения соответствующих симптомов). Однако нельзя исключить возможность поврежде­ния тканей в результате клеточно-опосредованной цитотоксичности или прямого повреждения антителами тканей-мишеней.

Статью подготовил и отредактировал: врач-хирург

Антитела к нуклеопротеидам можно определить с помощью иммунологических реакций.

1. Тест на выявление LE-клеток. В 1948 г. Hargraves и соавт. в мазках костного мозга и периферической крови больных СКВ обнаружили при инкубации, 37°С, лейкоциты с особыми включениями, которые были названы LE-клетками. Haserick и соавт. показали, что аналогичные клетки появляются и в тех случаях, когда лейкоциты здоровых лиц инкубируют с сывороткой или плазмой больных СКВ. Тест на LE-клетки оказывается положительным в 75% случаев. Особенно часто их определяют в остром периоде. LE-клетки не специфичны для СКВ, но чем чаще воспроизводится положительный тест при повторных исследованиях, тем выше вероятность данного диагноза.

В незначительном проценте случаев этот феномен обнаруживают и при других заболеваниях, сопровождаемых выработкой АНФ. Последние относятся к антителам класса IgG. Согласно мнению большинства авторов, ответственным антигеном служат структуры нуклеопротеидов, другие исследователи придают особое значение антителам к ДНК.

В феномене LE различают две фазы:

А) иммунологическая. Повреждение клетки с деформацией (набуханием) ядра и утратой хроматина, базофилия, что служит предпосылкой для проявления активности антител. Далее следует фиксация антител на ядре, что маскируется благодаря отрицательному заряду нуклеиновых кислот;

Б) неспецифическая. Материал ядра в виде серовато-дымчатой массы фагоцитируется клетками, которые становятся типичными для красной волчанки. Определенное значение как при воздействии антител, так и при фагоцитозе имеет комплемент. LE-феномен является следствием как реакции антител, так и фагоцитоза опсонизированного материала клеточных ядер. Фагоциты - это в первую очередь полиморфно-ядерные нейтрофильные, а реже эозинофильные и базофильные гранулоциты. Так называемые свободные частицы имеют разнообразную форму. Они могут быть гомогенно и негомогенно окрашенными. В одних случаях это измененные нефагоцитированные ядра, а в других - структуры ядра, которые уже были фагоцитированы и появились из разрушившихся фагоцитов. Крупные, окрашенные гематоксилином структуры возникают в результате флоккуляции. Это же происходит и в тканях.

In vivo LE-клетки присутствуют в периферической крови, нерикардиальном и плевральном выпотах, а также в области поражения кожи.

Тест на LE-клетки имеет следующие модификации:

Прямой тест с использованием проб крови и костного мозга больного;

Непрямой тест с использованием донорских лейкоцитов в качестве субстрата для анализа сыворотки больного и оценки фагоцитоза.

На практике обычно применяют прямой вариант теста. Информативен также метод Rebuck.

2. Реакция розеткообразования. Наблюдаемые розетки состоят из круглых или неправильной формы LE-частиц, окруженных полиморфно-ядерными гранулоцитами. Вероятно, центральные структуры представляют собой промежуточную стадию между «loose bodies» и LE-клетками.

3. «В-клетки» по Heller и Zimmermann напоминают типичные LE-клетки, однако включения менее гомогенны, поэтому различия в окраске между включениями и ядрами фагоцитирующих клеток выражены слабо.

4. Нуклеофагоцитоз, т. е. обнаружение фагоцитоза ядер без типичных изменений их структур, что не имеет диагностического значения для СКВ.

5. Другие методы выявления антител к нуклеопротеидам: РСК, иммунофлюоресценция по Friou, а также агглютинация частиц носителя, конъюгированного нуклеопротеидами. В целом отмечают четкую корреляцию с пробой на LE-клетки.

Конфигурация нуклеопротеидов, выступающих в роли антигенов, еще неизвестна. Tan и соавт., использовав фосфатный буфер, экстрагировали растворимую фракцию нуклеопротеида из клеток вилочковой железы телят. Этот антиген реагировал с антителами к нуклеопротеидам больных СКВ, а также некоторых больных РА. После обработки препарата трипсином и дезоксирибонуклеазой антигенность утрачивалась. Авторы предположили, что в образовании антигенных детерминант участвуют как гистоны, так и ДНК, однако большая часть антител к нуклеопротеидам реагирует с нерастворимым нуклеопротеидом и даст гомогенную флюоресценцию. Для антител к растворимой фракции нуклеопротеидов характерна преимущественно периферическая окраска (связывание), которая свойственна также антителам к ДНК. Анти-ДНК-сыворотки содержат большей частью и антитела к нуклеопротеидам.

Антитела к ДНК . Как показал анализ экспериментальных данных, нативная ДНК - это довольно слабый антиген. При использовании денатурированной ДНК и адъюванта удается индуцировать выработку антител. Это объясняет, почему изучаемые при СКВ антитела к ДНК реагируют отчасти с денатурированной ДНК, отчасти с нативной, а иногда и с той, и с другой. Последние отличаются гетерогенностью. Участки связывания с антигеном включают последовательность из пяти оснований (среди которых гуанозин играет особую роль) и, очевидно, расположены в разных зонах макромолекулы. Особое значение, вероятно, имеют аденозин и тимидин. Антитела к денатурированной ДНК часто реагируют и с денатурированной РНК.

Антитела к ДНК заслуживают пристального внимания, так как они высокоспецифичны для СКВ. Для решения вопроса о том, направлены ли они против нативной или денатурированной ДНК, используют реакцию пассивной агглютинации (антиген предварительно конъюгируют с носителем: латексом или эритроцитами). Это довольно чувствительный метод, дающий положительный результат в 50-75 % случаев. С помощью прямой преципитации в агаровом геле положительные результаты получают только в 6-10%, а при иммуноэлектрофорезе - в 35-80 % случаев. Доказательство выработки антител к нативной ДНК имеет практическое значение, поскольку данный феномен высокоспецифичен для СКВ. С этой целью используют РИМ или иммунофлюоресценцию. В первом тесте применяют меченую ДНК. После добавления Ат-содержащей сыворотки происходит разделение свободной и связанной ДНК, обычно путем осаждения сульфатом аммония или полиэтиленгликолем, фильтрования через миллипоровые фильтры (целлюлоза) или с помощью техники двойных антител. Последний метод более специфичен, так как устраняет влияние неспецифического связывания основного белка на ДНК. Способность к связыванию сывороток больных СКВ может быть в 30-50 раз выше, чем у здоровых лиц. Критическими факторами являются различная молекулярная масса ДНК, а также примеси денатурированной ДНК и других белков. На практике часто используют технику «твердая фаза»: ДНК фиксируется на поверхности пластика или целлюлозы. На втором этапе осуществляется инкубация с исследуемой сывороткой. Для связывания антител используют меченый анти-Ig. Происхождение ДНК в этих реакциях не играет существенной роли. При разделении комплексов антиген - антитело всегда происходит определенная денатурация. Обычные методы очистки не гарантируют абсолютного устранения этой ДНК. Значительно более стабильна ДНК бактериофага. Аналогичным образом можно использовать ELISA-технику.

Благодаря применению трипаносом или Crithidia luciliae возможно определение антител к ДНК иммунофлюоресцентным методом. У этих жгутиковых ДНК локализуется в гигантских митохондриях. При соответствующей обработке и применении непрямого метода иммунофлюоресценции можно выявить только антитела ДНК. Чувствительность этого теста несколько ниже, чем РИМ. При помощи анти-С3-сыворотки, меченной флюоресцеинизотиоцианатом, можно обнаружить С-связанные антитела к ДНК, что, очевидно, ценно для определения активности процесса.

Антитела к нативной ДНК имеют диагностическое значение практически только при СКВ (в остром периоде в 80-98%, в ремиссии - 30-70 %); лишь иногда их обнаруживают при определенных формах увеита. При других заболеваниях дискутируется вопрос, идет ли речь именно об антителах к нативной ДНК. Высокий титр не всегда сочетается с выраженной активностью процесса. Одновременное изменение концентрации комплемента позволяет предположить поражение почек. IgG-антитела играют, вероятно, большую патогенетическую роль, чем IgM. Однократный положительный тест на выявление антител к ДНК позволяет сделать диагностический, но не прогностический вывод, и лишь поддержание в течение длительного времени повышенного уровня этих антител можно расценивать как прогностически неблагоприятный признак. Снижение уровня предвещает ремиссию или (иногда) летальный исход. Некоторые авторы отмечают более выраженную корреляцию активности процесса с содержанием комплементсвязывающих антител.

При иммунофлюоресценции антитела к ДНК обнаруживают преимущественно по периферии ядра, однако иногда в виде нежного сетчатого образования они распределены и в других участках. С помощью достаточно чувствительных методов удается выявить в сыворотке ДНК с концентрацией до 250 мг/л.

Антитела к РНК , или антирибосомные антитела, обнаруживают у 40-80 % больных СКВ. Их титр не зависит от уровня антител к ДНК и степени активности процесса. Гораздо реже антитела к РНК определяют при Myasthenia gravis, склеродермии , ревматоидном артрите , включая синдром Шегрена, а также среди близких больного и у здоровых лиц. Они реагируют как с нативной, так и синтетической РНК. При других заболеваниях они почти не встречаются. При синдроме Шарпа определяются антитела преимущественно к РНП. Антитела при СКВ относительно гетерогенны и реагируют преимущественно с уридиновыми основаниями, а при склеродермии - с урациловыми основаниями РНК. Антитела к синтетической полирибоадениловой кислоте при СКВ обнаруживают у 75%, при дискоидной волчанке у 65 %, при других заболеваниях соединительной ткани у 0-7 % больных. Часто антитела выявляют у родственников больных СКВ (преимущественно IgM). Рибосомные антитела реагируют в ряде случаев со свободной рибосомой РНК.

Антитела к гистону . Гистоны - это смесь низкомолекулярных белков, которые посредством своих оснований-структур связывают ДНК. Антигистоновые Ат определяются при волчанке (прежде всего вызванной лекарствами) и РА. Они проявляют отчасти разную специфичность. Так, при СКВ эти антитела направлены в основном против HI, Н2В и Н3. Их выявляют у 30-60 %, а в низком титре даже у 80% больных. Антитела к Н2В ассоциируются с фоточувствительностью. При prokainamid-индуцированной волчанке определяемые АНФ направлены прежде всего против гистонов. При клинических проявлениях это главным образом IgG-антитела к Н2А-Н2В-комплексу, при асимптомных состояниях - IgM-антитела, у которых нельзя распознать их специфичность к определенному классу гистонов. Самый высокий титр антигистоновых антител описан при ревматоидном васкулите (лишь отчасти это обусловлено перекрестно реагирующим РФ). Высокочувствительные методы, такие как иммунофлюоресценция, РИМ, ELISA, иммуноблоттинг, позволяют проводить анализ при использовании наиболее очищенных гистонов. Антитела к гистонам не обладают видо- или тканеспецифичностью.

Антитела к негистоновым белкам - к экстрагируемым антигенам ядра. Ответственный антиген гетерогенен. Его основными фрагментами являются антигены Sm и РНП. Вероятно, имеются и другие фракции, о чем свидетельствуют данные иммуноэлектрофореза при использовании экстрактов вилочковой железы кролика и теленка.

Иммунофлюоресценция демонстрирует картину пятна. Локализацию антител установить довольно сложно. Весь пул антител к негистоновым белкам можно определить в тесте пассивной агглютинации и РСК. Положительные результаты получены при СКВ в 40-60%, при ревматоидном артрите - в 15,5% и при других заболеваниях соединительной ткани - в 1 % случаев. Особое место занимает синдром Шарпа.

Антиген экстрагируют из фракции клеточных ядер с использованием фосфатного буфера. Он стабилен к воздействию рибо- и дезоксирибонуклеаз, трипсина, эфира, а также нагревания до 56 °С. В химическом отношении это гликопротеид. При СКВ антитела к Sm-антигену обнаруживают почти в 30 % случаев посредством преципитации в геле и пассивной агглютинации, и наоборот: при выявлении данных антител 85 % обследуемых болели системной красной волчанкой .

Sm-антитела преципитируют пять малых РНК (U1, U, U4- U6). РНП-антитела распознают 5s-нуклеотидную последовательность вместе с определенной полипептидной структурой. Фактически с помощью антител можно блокировать сплайсинг, однако до сих пор отсутствуют данные, указывающие на патогенетическую роль этих механизмов. Согласно новым исследованиям, участки связывания для двух видов антител расположены на одной молекуле, причем с разными эпитопами. Sm-Ar может присутствовать также в свободной форме. Sm-антитела связываются на нуклеотидной последовательности вблизи белковой структуры.

Антитела к антигенам центромеры направлены против кинетоструктур центромеры. Антиген определяется в метафазе. Для его обнаружения наиболее пригодны быстро делящиеся клеточные линии, например, НЕр-2-линия, полученная из культивируемых клеток карциномы гортани.

РМ-1-комплекс . Очевидно, это гетерогенный, чувствительный к нагреванию и обработке трипсином антиген. Отмечено высокое содержание в вилочковой железе телят, в частности, также в ядрышках. Антитела к этому антигену встречаются при сочетании полимиозит - склеродермия в 12% случаев, при полимиозите в 9 % и склеродермии в 8 % случаев. Иногда РМ-1-антитела служат единственным видом выявляемых аутоантител и тем самым представляют особую диагностическую ценность. Ранее сообщенные данные о высоком уровне этих антител были вызваны наличием примесей.

PCNA . Антитела к этому антигену были обнаружены с помощью полиморфной иммунофлюоресценции при использовании клеточной линии.

Mi-система . Как показали относительно новые исследования, в качестве антигена функционирует IgG, но в несколько измененном виде, однако попытка идентифицировать антитела, используя в реакциях ревматоидный фактор, оказалась безуспешной. Вопрос о диагностическом значении антител можно считать несостоятельным.

Антитела к ядрышкам также выявляют при СКВ (примерно в 25% случаев), но значительно чаще (более 50%) и в высоком титре при генерализованной форме склеродермии, кроме того, почти у 8 % больных ревматоидным артритом.

Для оценки иммунной системы больных СКВ целесообразно определять уровень антител к ДНК и активность комплемента. Крайне низкий уровень последнего при довольно высоком титре комплементсвязывающих антител к ДНК свидетельствует об активной фазе заболевания с вовлечением в процесс почек. Снижение титра комплемента часто предшествует клиническому кризу. С активностью иммунных реакций при СКВ особенно коррелирует уровень IgG-антител (к ДНК и РНК).

Терапия кортикоидами и иммуносупрессантами часто приводит к быстрому снижению способности ДНК-связывания, что можно объяснить не только снижением выработки антител. При лекарственных формах, в частности при лечении гидралазином, иногда обнаруживают антитела к ДНК.

При РА часто выделяют СКВ-подобные формы течения, при которых выявляют LE-клетки. В соответствии с этим наблюдают иммунофлюоресценцию и определяют антитела к нуклеопротеидам. В исключительных случаях обнаруживают антитела к ДНК, тогда при этом возможно сочетание двух заболеваний. АНФ при ревматоидном артрите чаще относятся к иммуноглобулинам класса М.

При склеродермии также довольно часто выявляют АНФ (60-80 %), однако титр их, как правило, ниже, чем при РА. Распределение по классам иммуноглобулинов соответствует таковому при СКВ. В 2/3 случаев флюоресценция бывает пятнистой, в 1/3 - гомогенной. Довольно характерна флюоресценция ядрышек. В половине наблюдений антитела связывают комплемент. Обращает на себя внимание определенное расхождение между положительными результатами общего определения АНФ и отсутствием или выработкой в низком титре антител к нуклеопротеидам и ДНК. Это показывает, что АНФ в основном направлены против субстанций, не содержащих хроматина. Между присутствием АНФ и длительностью, а также степенью тяжести заболевания не отмечается взаимосвязи. Чаще всего корреляции обнаруживают у тех больных, сыворотка которых содержит также ревматоидный фактор.

Кроме ревматических заболеваний, АНФ обнаруживают при хроническом активном гепатите (30-50% наблюдений). Титр их иногда достигает 1:1000. По данным разных авторов, при дискоидной красной волчанке АНФ выявляют максимально у 50 % больных.

Практически идеальным скрининг-методом является иммунофлюоресценция. При титре Ат ниже 1:50 она малоинформативна (особенно у пожилых лиц). Титр выше 1:1000 наблюдают только при СКВ, люпоидном гепатите и иногда при склеродермии. Чаще всего обнаруживают антитела к нуклеопротеидам (94%). Информативным тестом считают выявление антител к ДНК.

Волчанка является довольно распространенным аутоиммунным заболеванием: например, в США ею страдают примерно полтора миллиона человек. Это заболевание поражает различные органы, такие как головной мозг, кожа, почки и суставы. Симптомы волчанки легко спутать с симптомами других болезней, что усложняет ее диагностику. Полезно знать симптомы и методы диагностики волчанки, чтобы она не застала вас врасплох. Следует также знать о причинах волчанки, чтобы избегать потенциальных факторов риска.


Внимание: информация в данной статье носит исключительно ознакомительный характер. При появлении нижеописанных симптомов проконсультируйтесь с врачом.

Шаги

Симптомы волчанки

    Проверьте, нет ли у вас на лице сыпи в форме крыльев бабочки. В среднем у 30 процентов больных волчанкой на лице появляется характерная сыпь, о которой часто говорят, что она напоминает по форме бабочку или волчий укус. Сыпь покрывает щеки и нос и иногда доходит до самых глаз.

    • Проверьте также, нет ли у вас дискообразной сыпи на лице, коже головы и шее. Такая сыпь имеет вид красных приподнятых пятен и может быть настолько сильной, что после нее остаются шрамы.
    • Обратите особое внимание на сыпь, которая появляется или усиливается под воздействием солнечных лучей. Чувствительность к естественному или искусственному ультрафиолетовому излучению может вызвать сыпь на освещенных солнцем участках тела и ухудшить сыпь в виде бабочки на лице. Такая сыпь более обильна и появляется быстрее, чем при обычном солнечном ожоге.

  1. Проверьте, нет ли язв во рту и носовой полости. Если у вас часто появляются язвы на верхнем небе, в уголках рта, на деснах или в носу, это служит еще одним тревожным признаком. Обратите особое внимание на безболезненные язвы. Как правило, при волчанке язвы во рту и в носу не болят.

    • Светочувствительность язв, то есть их обострение под воздействием солнечного света, является еще одним признаком волчанки.

  2. Присмотритесь к признакам воспаления. У больных волчанкой часто наблюдается воспаление суставов, легких и тканей вокруг сердца (околосердечной сумки). Обычно воспаляются и соответствующие кровеносные сосуды. Воспаление можно определить по отеку ступней, ног, ладоней и глаз.

    Обратите внимание на работу почек. Хотя в домашних условиях сложно оценить состояние почек, это все же можно сделать по некоторым признакам. Если из-за волчанки почки не в состоянии отфильтровывать мочу, могут отечь ступни ног. Более того, развитие почечной недостаточности может сопровождаться тошнотой и слабостью.

    Присмотритесь к возможным проблемам с мозгом и нервной системой. Волчанка может поразить нервную систему. Некоторые симптомы, например чувство тревоги, головная боль и проблемы со зрением, наблюдаются и при многих других заболеваниях. Вместе с тем волчанка может сопровождаться и такими очень серьезными симптомами, как судороги и изменения личности.

    • Хотя волчанка часто сопровождается головной болью, по этой боли очень сложно выявить данную болезнь. Головная боль является распространенным симптомом и может быть вызвана самыми разными причинами.

  3. Посмотрите, не чаще ли вы чувствуете усталость, чем обычно. Сильная усталость служит еще одним признаком волчанки. Хотя чувство усталости может быть вызвано самыми разными причинами, часто эти причины связаны с волчанкой. Если усталость сопровождается жаром, это является еще одним признаком волчанки.

    Присмотритесь к другим необычным признакам. Под воздействием холода пальцы на руках и ногах могут менять свой цвет (белеть или синеть). Это явление называют болезнью Рейно, и оно часто сопутствует волчанке. Возможны также сухость глаз и затрудненное дыхание. Если все эти симптомы наблюдаются одновременно, у вас может быть волчанка.

    Узнайте о тестах, в которых используются визуальные методы диагностики. Если врач заподозрит, что волчанка могла затронуть легкие или сердце, он может назначить исследование, которое позволит увидеть внутренние органы. Чтобы выяснить состояние ваших легких, вас могут направить на стандартную флюорографию грудной клетки, в то время как эхокардиограмма позволит судить о здоровье вашего сердца.

    • На рентгеновском снимке грудной клетки иногда видны затененные области в легких, которые могут указывать на скопление жидкости или воспаление.
    • При эхокардиографии используются звуковые волны для того, чтобы измерить сердцебиение и выявить возможные проблемы с сердцем.

  4. Узнайте насчет биопсии. Если врач подозревает, что волчанка привела к повреждению почек, он может назначить биопсию почки. У вас возьмут образец ткани почки для анализа. Это позволит оценить состояние почек, степень и тип их повреждения. Биопсия поможет врачу определить оптимальные методы лечения волчанки.

Описание

Исследуемый материал Сыворотка крови

№ 997 Антитела к кардиолипину класса IgM

При системной красной волчанке (СКВ) и других системных ревматических заболеваниях иммунный ответ направлен против нуклеопротеиновых антигенов, т.е. комплексов нуклеиновых кислот и белков. В настоящее время описаны около 200 разновидностей антител к нуклеопротеинам и рибонуклеиновым кислотам, которые получили название антинуклеарные антитела.

Антинуклеарный фактор на клеточной линии НЕр-2 (см. описание теста) позволяет выявлять 90-95% всех антинуклеарных антител, поскольку человеческие клетки содержат все антигены антинуклеарных антител, включая структурные, нерастворимые и конформационные. Антинуклеарный фактор на клеточной линии НЕр-2 встречается при СКВ, других системных ревматических заболеваниях и многих аутоиммунных заболеваниях, что делает его универсальным тестом в обследовании больных с аутоиммунной патологией. Выявление антинуклеарного фактора имеет большое значение при СКВ, поскольку его титры коррелируют с тяжестью заболевания и снижаются при эффективной терапии.

Антитела к нуклеосомам являются одними из первых аутоантител, которые формируются в организме в ходе развития СКВ. Антитела к нуклеосомам, как и антитела к дс-ДНК, могут играть большую роль в патогенезе поражения почек при волчаночном нефрите. Высокий уровень антинуклеосомных антител характерен исключительно для больных с активной СКВ, сопровождающейся нефритом, и их уровень положительно коррелирует с показателями активности заболевания. Уровень антител к нуклеосомам увеличивается непосредственно перед вспышкой СКВ параллельно с развитием гломерулонефрита.

Антитела к кардиолипину классов IgG и IgM - основные представители семейства антифосфолипидных антител. Наряду с антителами к бета-2-гликопротеину, антитела к кардиолипину входят в лабораторные критерии антифосфолипидного синдрома, а вместе с антителами к двуспиральной ДНК и Sm-антигену - в иммунологические критерии системной красной волчанки.

Литература

  1. Лапин С.В. Тотолян А.А. Иммунологическая лабораторная диагностика аутоиммунных заболеваний/ Издательство «Человек», СПб - 2010. 272 c.
  2. Насонов Е.Л., Александрова Е.Н. Современные стандарты лабораторной диагностики ревматических заболеваний. Клинические рекомендации / БХМ, М - 2006.
  3. Conrad K, Schlosler W., Hiepe F., Fitzler M.J. Autoantibodies in Organ Specific Autoimmune Diseases: A Diagnostic Reference/ PABST, Dresden – 2011. 300 p.
  4. Conrad K, Schlosler W., Hiepe F., Fitzler M.J. Autoantibodies in Systemic Autoimmune Diseases: A Diagnostic Reference/ PABST, Dresden – 2007. 300 p.
  5. Gershvin ME, Meroni PL, Shoenfeld Y. Autoantibodies 2nd ed./ Elsevier Science – 2006. 862 p.
  6. Shoenfeld Y., Cervera R, Gershvin ME Diagnostic Criteria in Autoimmune Diseases / Humana Press – 2008. 598 p.
  7. Инструкции к набору реагентов.

Подготовка

Предпочтительно выдержать 4 часа после последнего приема пищи, обязательных требований нет.

Показания к назначению

Исследование показано для диагностики и мониторинга следующих состояний:

  • системная красная волчанка;
  • волчаночный гломерулонефрит;
  • лекарственная волчанка;
  • вторичный антифосфолипидный синдром при системной красной волчанке.

Интерпретация результатов

Интерпретация результатов исследований содержит информацию для лечащего врача и не является диагнозом. Информацию из этого раздела нельзя использовать для самодиагностики и самолечения. Точный диагноз ставит врач, используя как результаты данного обследовани¤, так и нужную информацию из других источников: анамнеза, результатов других обследований и т.д.

Антинуклеарный фактор, антитела к нуклеосомам и антитела к кардиолипину классов IgG и IgM играют большую роль в диагностике и мониторинге пациентов с СКВ. Мониторинг титров антинуклеарного фактора, содержания антител к нуклеосомам и антител к дс-ДНК рекомендуется проводить каждые 3 месяца.

Относящееся к группе больших коллагенозов, которое характеризуется диффузным поражением соединительной ткани и сосудов. Ранняя диагностика этой патологии является серьезной проблемой, так как СКВ может начинаться под «маской» других заболеваний. Поскольку СКВ является аутоиммунным заболеванием, то механизм его клинических проявлений, согласно современным представлениям, объясняется со следующих позиций:

  • циркулирующие иммунные комплексы (ЦИК), в состав которых входят антиядерные антитела, депонируясь в микроциркуляторном звене, приводят к развитию васкулопатий и повреждению тканей;
  • аутоантитела к клеткам крови приводят к лейко-, лимфотромбопении и анемии;
  • антифосфолипидные антитела приводят к развитию антифосфолипидного синдрома (АФС).

Современные методы иммунологической лабораторной диагностики позволяют идентифицировать все компоненты патогенеза СКВ и тем самым с необыкновенной, практически 100% точностью, верифицировать диагноз заболевания. Вместе с тем наличие любых изменений в анализах позволяет их интерпретировать только с учетом индивидуальной клинической картины.

Следует отметить, что прежний способ диагностики СКВ по наличию в крови LE-клеток не выдержал испытание временем, показав крайне низкую чувствительность и специфичность, в связи с чем от него отказались. LE-клетки даже не включены в систему критериев СКВ.

Основными маркерами СКВ являются:

Показания для назначения анализа крови на маркеры системной красной волчанки

  • кожная волчанка;
  • лекарственная волчанка;
  • тромбоцитопеническая пурпура;
  • эритродермия;
  • тяжелые поражения печени;
  • CREST синдром;
  • полимиозит;
  • дерматомиозит;
  • хронический ювенильный артрит;
  • аутоиммунный гепатит;
  • склерозирующий холангит;
  • полинейропатии;
  • миелит;

Как проходит процедура?

Забор крови осуществляется из локтевой вены натощак утром.

Подготовка к анализу

Волчаночный антикоагулянт

Волчаночный антикоагулянт (ВА, Lupus anticoagulants, LA) один из важных скрининговых и подтверждающих тестов диагностики АФС. ВА образуются в организме в результате развития аутоиммунных процессов после инфекционных воздействий и подавляют в крови реакцию превращения протромбина в тромбин. При выявлении этих антител в крови по удлинению коагуляционных тестов, их определяют как «волчаночный антикоагулянт».

Положительный результат:

  • опухоли;

Антинуклеарный фактор

Антинуклеарный фактор на клеточной линии НЕр-2 (АНФ HEp-2, титры; ANA IF, titers). Положительный результат АНФ отмечается более чем у 90% больных с СКВ и кожными формами этого заболевания, склеродермии , смешанном заболевании соединительной ткани , синдроме Шегрена . Результатом определения АНФ является титр, представляющий собой значение конечного разведения сыворотки, при котором сохраняется значимая флюоресценция ядра. Чем выше знаменатель дроби, тем больше разведение сыворотки, тем больше антител в сыворотке больного. Чувствительность этого теста для СКВ составляет 95%.

Высокие титры АНФ (1/640 и выше):

Низкие титры АНФ (до 1/160):

  • у 1-2% здоровых лиц;
  • у родственников больных с системными заболеваниями;
  • многие аутоиммунные , инфекционные и онкологические заболевания .

Антитела к нуклеосомам

Антитела к нуклеосомам (NCA) являются одними из первых, которые формируются в организме в ходе развития СКВ. Титры NCA коррелируют с активностью заболевания. Специфичность определения данных аутоантител для диагностики СКВ более 95%.

Расшифровка результата анализа

Высокое содержание антител к нуклеосомам (положительно):

  • лекарственная волчанка;
  • активная СКВ, сопровождающаяся нефритом.
  • низкая вероятность СКВ;
  • низкий риск поражения почек при СКВ.

Антитела класса IgG к двуспиральной ДНК

Присутствие антител класса IgG к двуспиральной ДНК (анти-дсДНК IgG; anti-dsDNA IgG) высокоспецифично для СКВ, в меньшей степени — при других диффузных болезнях соединительной ткани или лекарственно-индуцированной СКВ. Чувствительность теста для СКВ составляет 85%. Количественное определение анти-дсДНК IgG антител более всего подходит для мониторинга состояния, прогноза и контроля терапии у пациентов СКВ, так как коррелирует с ее активностью и тяжестью гломерулонефрита.

Расшифровка результат анализа

Повышение уровня:

  • инфекция, вызванная вирусом Эпштейна-Барра;

Понижение уровня:

  • норма.

Антитела к кардиолипину IgG

Антитела к кардиолипину IgG (aCL IgG) — один из видов аутоиммунных антифосфолипидных антител, включенных в патогенез антифосфолипидного синдрома. Их наличие в крови манифестируется пролонгированием фосфолипидзависимых тестов коагулограммы (протромбин, АЧТВ), что обозначают как «волчаночный антикоагулянт».

Расшифровка результата анализа

  • лекарственная волчанка;
  • гепатит С;
  • бореллиоз;
  • ВИЧ-инфекция.

Антитела к кардиолипину IgM

Антитела к кардиолипину IgM (aCL IgM) при их выявлении указывает на высокий риск развития СКВ; aCL IgM выявляются у 20-50% больных с системной красной волчанкой и 3-20% больных с другими системными ревматическими заболеваниями.

Интерпретация

Положительно (антитела обнаружены):

Нормы

Показатель Норма
Волчаночный антикоагулянт (ВА, Lupus anticoagulants, LA) отрицатено
Антинуклеарный фактор на клеточной линии НЕр-2 (АНФ HEp-2, титры; ANA IF, titers) < 1:160
Антитела к нуклеосомам < 20 отн. ед./мл
Антитела класса IgG к двуспиральной ДНК < 20 МЕ/мл (отрицательно)
Антитела к кардиолипину IgG (aCL IgG) отрицательно либо < 12 GPL-ед./мл
Антитела к кардиолипину IgM (aCL IgM) < 12 MPL-ед./мл